 |
Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Synoviae
【Tên sản phẩm】Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Synoviae (MS)
【Bưu kiện】50 bộ/hộp
【Chỉ định】Real-time PCR Detection Kit for Mycoplasma Synoviae có thể áp dụng để phát hiện DNA của Mycoplasma Synoviae trong mẫu hô hấp gia cầm, mô phổi và các mẫu khác.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng kép MS | 900µl/Ống | 1 |
Kiểm soát Tích cực Đôi MS | 100µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 100µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Lý thuyết】
Bộ công cụ này dựa trên Công nghệ PCR huỳnh quang thời gian thực. Nó chọn loại vi-rút hoang dã Mycoplasma Synoviaes và vùng được bảo tồn của chủng vắc-xin MS-H làm vùng mục tiêu khuếch đại, thiết kế các đầu dò mồi cụ thể và đánh dấu các nhóm huỳnh quang khác nhau, đồng thời tiến hành định tính phát hiện Mycoplasma Synoviae thông qua khuếch đại hệ thống PCR huỳnh quang thời gian thực một bước. Ngoài mồi và mẫu dò huỳnh quang cụ thể, hệ thống phản ứng còn được trang bị Bộ đệm PCR tương ứng, enzyme Taq.dNTPs, Mg2+ và các thành phần khác, có thể đạt được khả năng phát hiện cụ thể và nhạy cảm đối với axit nucleic của MS, đồng thời xác định chủng vi-rút hoang dã và chủng vắc-xin MS-H.
【Dụng cụ】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 hoặc các thiết bị PCR định lượng huỳnh quang tương tự khác.
【Yêu cầu mẫu】
Mẫu đường hô hấp và mẫu phổi.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 18µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 2µl axit nucleic của các mẫu đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và axit nucleic lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000rpm trong vài giây và đưa chúng vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang.
3. khuếch đại qR-T-PCR
3.1 Lựa chọn kênh huỳnh quang
Người báo cáo Dye1: chọn kênh FAM để phát hiện chủng vắc-xin MS-H, Quencher Dye: KHÔNG
Trình báo Dye2: chọn kênh VIC hoặc HEX để phát hiện chủng vi rút hoang dã MS, Quencher Dye2: KHÔNG, tham chiếu thụ động: KHÔNG.Tham khảo hướng dẫn sử dụng nhạc cụ cho các nhạc cụ khác.
3.2 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
tiền biến tính | 95℃ trong 5 phút | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây | |||
【Giải thích kết quả】
1. Các yêu cầu sau phải được đáp ứng đồng thời trong một lần thử nghiệm, nếu không thì thử nghiệm không hợp lệ và cần được lặp lại.
Đối chứng âm không có đường cong khuếch đại
Đường cong khuếch đại của kênh FAM kiểm soát dương có giai đoạn tăng logarit đáng kể và giá trị Ct của đường cong khuếch đại kênh FAM là ≤ 32.
2. Nếu kênh FAM của mẫu xét nghiệm không có đường cong khuếch đại, mẫu đó có thể được xác định là âm tính với IBDV.Nếu kênh FAM có đường cong khuếch đại pha tăng trưởng logarit và giá trị Ct ≤ 36, có thể được xác định là dương tính với IBDV.36 < Giá trị Ct < 40 là những mẫu nghi ngờ, cần xét nghiệm lại để khẳng định.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu xét nghiệm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Synoviae
【Tên sản phẩm】Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Synoviae (MS)
【Bưu kiện】50 bộ/hộp
【Chỉ định】Real-time PCR Detection Kit for Mycoplasma Synoviae có thể áp dụng để phát hiện DNA của Mycoplasma Synoviae trong mẫu hô hấp gia cầm, mô phổi và các mẫu khác.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng kép MS | 900µl/Ống | 1 |
Kiểm soát Tích cực Đôi MS | 100µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 100µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Lý thuyết】
Bộ công cụ này dựa trên Công nghệ PCR huỳnh quang thời gian thực. Nó chọn loại vi-rút hoang dã Mycoplasma Synoviaes và vùng được bảo tồn của chủng vắc-xin MS-H làm vùng mục tiêu khuếch đại, thiết kế các đầu dò mồi cụ thể và đánh dấu các nhóm huỳnh quang khác nhau, đồng thời tiến hành định tính phát hiện Mycoplasma Synoviae thông qua khuếch đại hệ thống PCR huỳnh quang thời gian thực một bước. Ngoài mồi và mẫu dò huỳnh quang cụ thể, hệ thống phản ứng còn được trang bị Bộ đệm PCR tương ứng, enzyme Taq.dNTPs, Mg2+ và các thành phần khác, có thể đạt được khả năng phát hiện cụ thể và nhạy cảm đối với axit nucleic của MS, đồng thời xác định chủng vi-rút hoang dã và chủng vắc-xin MS-H.
【Dụng cụ】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 hoặc các thiết bị PCR định lượng huỳnh quang tương tự khác.
【Yêu cầu mẫu】
Mẫu đường hô hấp và mẫu phổi.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 18µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 2µl axit nucleic của các mẫu đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và axit nucleic lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000rpm trong vài giây và đưa chúng vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang.
3. khuếch đại qR-T-PCR
3.1 Lựa chọn kênh huỳnh quang
Người báo cáo Dye1: chọn kênh FAM để phát hiện chủng vắc-xin MS-H, Quencher Dye: KHÔNG
Trình báo Dye2: chọn kênh VIC hoặc HEX để phát hiện chủng vi rút hoang dã MS, Quencher Dye2: KHÔNG, tham chiếu thụ động: KHÔNG.Tham khảo hướng dẫn sử dụng nhạc cụ cho các nhạc cụ khác.
3.2 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
tiền biến tính | 95℃ trong 5 phút | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây | |||
【Giải thích kết quả】
1. Các yêu cầu sau phải được đáp ứng đồng thời trong một lần thử nghiệm, nếu không thì thử nghiệm không hợp lệ và cần được lặp lại.
Đối chứng âm không có đường cong khuếch đại
Đường cong khuếch đại của kênh FAM kiểm soát dương có giai đoạn tăng logarit đáng kể và giá trị Ct của đường cong khuếch đại kênh FAM là ≤ 32.
2. Nếu kênh FAM của mẫu xét nghiệm không có đường cong khuếch đại, mẫu đó có thể được xác định là âm tính với IBDV.Nếu kênh FAM có đường cong khuếch đại pha tăng trưởng logarit và giá trị Ct ≤ 36, có thể được xác định là dương tính với IBDV.36 < Giá trị Ct < 40 là những mẫu nghi ngờ, cần xét nghiệm lại để khẳng định.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu xét nghiệm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
