 |
Bộ phát hiện PCR vi rút gây hội chứng đốm trắng (WSSV) trên tôm (Xét nghiệm thăm dò huỳnh quang)
Tên sản phẩm: Real-time PCR Detection Kit virus hội chứng đốm trắng.
Bưu kiện: 50 bộ/hộp
chỉ định: Bộ kit này có thể áp dụng để phát hiện axit nucleic của DNA của virus gây hội chứng đốm trắng ở tôm trong mô cơ của tôm. Kết quả xét nghiệm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
Các thành phần và nội dung chính:
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng WSSV | 1000µl/Ống | 1 |
Kiểm soát Tích cực WSSV | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
Lưu trữ và thời hạn sử dụng:
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
Phương pháp kiểm tra:
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Cho 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào PCR định lượng huỳnh quang.
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
thu thập tín hiệu | tín hiệu huỳnh quang WSSV | Kênh FAM thu thập tín hiệu huỳnh quang | |
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
quá trình UNG | 37℃ trong 2 phút | 1 | |
tiền biến tính | 95℃ trong 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây Đặt để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này | |||
Đánh giá kết quả:
1. Bản án có hiệu lực:
1.1 Kiểm soát Tích cực: Giá trị Ct của kênh FAM ≤ 32 và đường cong khuếch đại có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể.
1.2 Kiểm soát Âm tính: Kênh FAM không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại là đường thẳng hoặc đường xiên nhẹ, không có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể và giá trị Ct ≥ 38 hoặc không có giá trị Ct.
2. Đánh giá kết quả kiểm tra:
2.1 Nếu có sự tăng trưởng đáng kể theo cấp số nhân trong kênh FAM và giá trị Ct ≤35, thì nó được đánh giá là dương tính với WSSV.
2.2 Nếu có sự tăng trưởng đáng kể theo cấp số nhân trong kênh FAM và giá trị Ct trong khoảng 35-38, thì nó được đánh giá là đáng ngờ WSSV.Mẫu phải được kiểm tra nhiều lần.Nếu giá trị Ct của các kết quả xét nghiệm lặp lại vẫn nằm trong khoảng 35-38 với giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể, thì nó được đánh giá là dương tính, nếu không thì nó là âm tính.
2.3 Nếu giá trị Ct của kết quả xét nghiệm FAM > 38 hoặc không có giá trị Ct thì được đánh giá là âm tính với WSSV
Các biện pháp phòng ngừa:
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
sản xuất:
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Bộ phát hiện PCR vi rút gây hội chứng đốm trắng (WSSV) trên tôm (Xét nghiệm thăm dò huỳnh quang)
Tên sản phẩm: Real-time PCR Detection Kit virus hội chứng đốm trắng.
Bưu kiện: 50 bộ/hộp
chỉ định: Bộ kit này có thể áp dụng để phát hiện axit nucleic của DNA của virus gây hội chứng đốm trắng ở tôm trong mô cơ của tôm. Kết quả xét nghiệm chỉ dành cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
Các thành phần và nội dung chính:
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng WSSV | 1000µl/Ống | 1 |
Kiểm soát Tích cực WSSV | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
Lưu trữ và thời hạn sử dụng:
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
Phương pháp kiểm tra:
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Cho 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào PCR định lượng huỳnh quang.
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
thu thập tín hiệu | tín hiệu huỳnh quang WSSV | Kênh FAM thu thập tín hiệu huỳnh quang | |
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
quá trình UNG | 37℃ trong 2 phút | 1 | |
tiền biến tính | 95℃ trong 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây Đặt để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này | |||
Đánh giá kết quả:
1. Bản án có hiệu lực:
1.1 Kiểm soát Tích cực: Giá trị Ct của kênh FAM ≤ 32 và đường cong khuếch đại có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể.
1.2 Kiểm soát Âm tính: Kênh FAM không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại là đường thẳng hoặc đường xiên nhẹ, không có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể và giá trị Ct ≥ 38 hoặc không có giá trị Ct.
2. Đánh giá kết quả kiểm tra:
2.1 Nếu có sự tăng trưởng đáng kể theo cấp số nhân trong kênh FAM và giá trị Ct ≤35, thì nó được đánh giá là dương tính với WSSV.
2.2 Nếu có sự tăng trưởng đáng kể theo cấp số nhân trong kênh FAM và giá trị Ct trong khoảng 35-38, thì nó được đánh giá là đáng ngờ WSSV.Mẫu phải được kiểm tra nhiều lần.Nếu giá trị Ct của các kết quả xét nghiệm lặp lại vẫn nằm trong khoảng 35-38 với giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể, thì nó được đánh giá là dương tính, nếu không thì nó là âm tính.
2.3 Nếu giá trị Ct của kết quả xét nghiệm FAM > 38 hoặc không có giá trị Ct thì được đánh giá là âm tính với WSSV
Các biện pháp phòng ngừa:
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
sản xuất:
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
