Tình trạng sẵn có: | |
---|---|
Real-Time PCR Detection Kit virus Dịch tả lợn châu Phi (MGF/CD2V/VP72)
【Tên sản phẩm】
Real-time PCR Detection Kit virus Dịch tả lợn châu Phi (MGF/CD2V/VP72)
【Bưu kiện】
50 bộ/hộp
【Thành phần chính và nội dung】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp ứng phó với ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1000µl/Ống | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Kiểm soát Tích cực | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và Thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃
≤ Cấp đông và rã đông lặp đi lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất DNA thương mại có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. Khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 5µl l acid nucleic của đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt cho vào các ống phản ứng PCR ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang..
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 30µl | ||
thu thập tín hiệu
| Tín hiệu huỳnh quang ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Kênh VP72-FAM thu tín hiệu huỳnh quang | |
Kênh CD2V-VIC/HEX thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Kênh MGF-CY5 thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR
| Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
xử lý UNG | 37℃: 2 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR
| 95℃: 10 giây |
40
| |
56℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
【Diễn giải kết quả】
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM, HEX/VIC và CY5 ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát âm tính: Các kênh FAM, HEX/VIC và CY5 không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên, không có pha hàm mũ đáng kể và giá trị Ct ≥ 38 hoặc không có giá trị Ct.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán quyết | kênh FAM | Kênh HEX/VIC | kênh CY5 |
VP72 ASFV axit nucleic dương tính | + | - | - |
CD2V ASFV axit nucleic dương tính | - | + | - |
MGF ASFV axit nucleic dương tính | - | - | + |
VP72 và CD2V ASFV axit nucleic dương tính | + | + | - |
VP72 và MGF ASFV axit nucleic dương tính | + | - | + |
Axit nucleic CD2V và MGF ASFV dương tính | - | + | + |
Axit nucleic MGF, CD2V và VP72 ASFV dương tính | + | + | + |
Âm tính với axit nucleic MGF, CD2V và VP72 ASFV | - | - | - |
*Ghi chú:
(1) Nếu có đường cong khuếch đại pha tăng trưởng logarit và giá trị Ct ≤ 35, thì nó được đánh giá là +.Nếu không có đường cong khuếch đại hoặc giá trị Ct > 38, nó được đánh giá là -.Mẫu nghi ngờ khi 35 < giá trị Ct < 38, phải xét nghiệm lại.Nếu giá trị Ct của kết quả xét nghiệm lại vẫn nằm trong khoảng 35-38 với giai đoạn tăng trưởng logarit rõ ràng, thì nó được đánh giá là dương tính, nếu không thì âm tính.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【Sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã bưu điện: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Real-Time PCR Detection Kit virus Dịch tả lợn châu Phi (MGF/CD2V/VP72)
【Tên sản phẩm】
Real-time PCR Detection Kit virus Dịch tả lợn châu Phi (MGF/CD2V/VP72)
【Bưu kiện】
50 bộ/hộp
【Thành phần chính và nội dung】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp ứng phó với ASFV (MGF/CD2V/VP72) | 1000µl/Ống | 1 |
ASFV (MGF/CD2V/VP72) Kiểm soát Tích cực | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và Thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃
≤ Cấp đông và rã đông lặp đi lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất DNA thương mại có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. Khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 5µl l acid nucleic của đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt cho vào các ống phản ứng PCR ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang..
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 30µl | ||
thu thập tín hiệu
| Tín hiệu huỳnh quang ASFV (MGF/CD2V/VP72)
| Kênh VP72-FAM thu tín hiệu huỳnh quang | |
Kênh CD2V-VIC/HEX thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Kênh MGF-CY5 thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR
| Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
xử lý UNG | 37℃: 2 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR
| 95℃: 10 giây |
40
| |
56℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
【Diễn giải kết quả】
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM, HEX/VIC và CY5 ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát âm tính: Các kênh FAM, HEX/VIC và CY5 không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên, không có pha hàm mũ đáng kể và giá trị Ct ≥ 38 hoặc không có giá trị Ct.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán quyết | kênh FAM | Kênh HEX/VIC | kênh CY5 |
VP72 ASFV axit nucleic dương tính | + | - | - |
CD2V ASFV axit nucleic dương tính | - | + | - |
MGF ASFV axit nucleic dương tính | - | - | + |
VP72 và CD2V ASFV axit nucleic dương tính | + | + | - |
VP72 và MGF ASFV axit nucleic dương tính | + | - | + |
Axit nucleic CD2V và MGF ASFV dương tính | - | + | + |
Axit nucleic MGF, CD2V và VP72 ASFV dương tính | + | + | + |
Âm tính với axit nucleic MGF, CD2V và VP72 ASFV | - | - | - |
*Ghi chú:
(1) Nếu có đường cong khuếch đại pha tăng trưởng logarit và giá trị Ct ≤ 35, thì nó được đánh giá là +.Nếu không có đường cong khuếch đại hoặc giá trị Ct > 38, nó được đánh giá là -.Mẫu nghi ngờ khi 35 < giá trị Ct < 38, phải xét nghiệm lại.Nếu giá trị Ct của kết quả xét nghiệm lại vẫn nằm trong khoảng 35-38 với giai đoạn tăng trưởng logarit rõ ràng, thì nó được đánh giá là dương tính, nếu không thì âm tính.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【Sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã bưu điện: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810