Tình trạng sẵn có: | |
---|---|
Rcon mồi-Bộ phát hiện PCR thời gian đối với Virus sốt lợn cổ điển, Hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn Và Vi-rút giả dại
[Tên sản phẩm] Bộ công cụ phát hiện PCR thời gian thực đối với vi-rút sốt lợn cổ điển, hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn và vi-rút Pseudorabies.
[Bưu kiện] 50 bài kiểm tra
[Chỉ định] Bộ công cụ phát hiện PCR thời gian thực đối với vi-rút sốt lợn cổ điển, hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn và vi-rút Pseudorabies được áp dụng để phát hiện axit nucleic của CSFV/PRRSV/PRS trong các mẫu amidan, bạch huyết, nước bọt, máu và tinh dịch.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
[Các thành phần và nội dung chính]
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Dung dịch phản ứng CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Ống | 1 |
CSFV/PRRSV/PRS Kiểm soát Dương tính | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
[Lưu trữ và thời hạn sử dụng]
Bảo quản ở nhiệt độ -20±5℃, Số lần cấp đông rã đông ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng 12 tháng.
[Phương pháp kiểm tra]
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất DNA/RNA đã được thương mại hóa có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, thêm 20µl to của dung dịch phản ứng vào mỗi ống.
2.2 Thêm 5µl axit nucleic của đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng / phút trong vài giây và đưa chúng vào máy quay vòng nhiệt.
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 30µl | ||
thu thập tín hiệu | Virus sốt lợn cổ điển (CSFV) - Kênh FAM thu thập tín hiệu huỳnh quang | ||
Hội chứng Hô hấp và Sinh sản ở lợn (PRRS) – Kênh HEX/VIC thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Pseudorabies Virus (PRV) - Kênh ROX thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR | Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
Phiên mã ngược | 50℃: 5 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃: 10 giây |
40 | |
60℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
[Giải thích kết quả]
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM, HEX/VIC và ROX ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát âm: Các kênh FAM, HEX/VIC và ROX không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán quyết | kênh FAM | Kênh HEX/VIC | kênh ROX |
CSFV axit dương tính | + | - | - |
PRRSV axit nucleic dương tính | - | + | - |
Axit nucleic PRV dương tính | - | - | + |
Axit nucleic của CSFV và PRRSV dương tính | + | + | - |
Axit nucleic CSFV và PRV dương tính | + | - | + |
PRRSV và axit nucleic PRV dương tính | - | + | + |
CSFV, PRRSV và axit nucleic PRV dương tính | + | + | + |
Âm tính với axit nucleic của CSFV, PRRSV và PRV | - | - | - |
*Ghi chú:
Nếu có một đường cong khuếch đại tăng trưởng theo cấp số nhân và giá trị Ct ≤ 36, nó được xác định là '+'.
Nếu không có đường cong khuếch đại, nó được xác định là '-'.
Nếu 36 < Giá trị Ct < 40, đó là mẫu nghi ngờ, và phân tích nên được lặp lại để xác nhận.
[Các biện pháp phòng ngừa]
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet phải được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
[sản xuất]
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Rcon mồi-Bộ phát hiện PCR thời gian đối với Virus sốt lợn cổ điển, Hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn Và Vi-rút giả dại
[Tên sản phẩm] Bộ công cụ phát hiện PCR thời gian thực đối với vi-rút sốt lợn cổ điển, hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn và vi-rút Pseudorabies.
[Bưu kiện] 50 bài kiểm tra
[Chỉ định] Bộ công cụ phát hiện PCR thời gian thực đối với vi-rút sốt lợn cổ điển, hội chứng hô hấp và sinh sản ở lợn và vi-rút Pseudorabies được áp dụng để phát hiện axit nucleic của CSFV/PRRSV/PRS trong các mẫu amidan, bạch huyết, nước bọt, máu và tinh dịch.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
[Các thành phần và nội dung chính]
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Dung dịch phản ứng CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Ống | 1 |
CSFV/PRRSV/PRS Kiểm soát Dương tính | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
[Lưu trữ và thời hạn sử dụng]
Bảo quản ở nhiệt độ -20±5℃, Số lần cấp đông rã đông ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng 12 tháng.
[Phương pháp kiểm tra]
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất DNA/RNA đã được thương mại hóa có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, thêm 20µl to của dung dịch phản ứng vào mỗi ống.
2.2 Thêm 5µl axit nucleic của đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng / phút trong vài giây và đưa chúng vào máy quay vòng nhiệt.
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 30µl | ||
thu thập tín hiệu | Virus sốt lợn cổ điển (CSFV) - Kênh FAM thu thập tín hiệu huỳnh quang | ||
Hội chứng Hô hấp và Sinh sản ở lợn (PRRS) – Kênh HEX/VIC thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Pseudorabies Virus (PRV) - Kênh ROX thu thập tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR | Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
Phiên mã ngược | 50℃: 5 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃: 10 giây |
40 | |
60℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
[Giải thích kết quả]
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM, HEX/VIC và ROX ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát âm: Các kênh FAM, HEX/VIC và ROX không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán quyết | kênh FAM | Kênh HEX/VIC | kênh ROX |
CSFV axit dương tính | + | - | - |
PRRSV axit nucleic dương tính | - | + | - |
Axit nucleic PRV dương tính | - | - | + |
Axit nucleic của CSFV và PRRSV dương tính | + | + | - |
Axit nucleic CSFV và PRV dương tính | + | - | + |
PRRSV và axit nucleic PRV dương tính | - | + | + |
CSFV, PRRSV và axit nucleic PRV dương tính | + | + | + |
Âm tính với axit nucleic của CSFV, PRRSV và PRV | - | - | - |
*Ghi chú:
Nếu có một đường cong khuếch đại tăng trưởng theo cấp số nhân và giá trị Ct ≤ 36, nó được xác định là '+'.
Nếu không có đường cong khuếch đại, nó được xác định là '-'.
Nếu 36 < Giá trị Ct < 40, đó là mẫu nghi ngờ, và phân tích nên được lặp lại để xác nhận.
[Các biện pháp phòng ngừa]
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải tuân thủ nghiêm ngặt các quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet phải được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
[sản xuất]
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810