 |
Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Bovis
【Tên sản phẩm】Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Bovis
【Bưu kiện】50 bài kiểm tra
【chỉ định】Real-time PCR Detection Kit for Mycoplasma Bovis được áp dụng để phát hiện RNA của Mycoplasma Bovis trong tăm bông mũi, sữa, mẫu dịch khớp.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng MB | 1150µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tích cực MB | 100µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 100µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất RNA đã được thương mại hóa có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. Khuếch đại PCR (Ví dụ về ABI 7500, tham khảo thao tác này và hướng dẫn sử dụng cho ABI 7300 và LC480.)
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho 20µl to của dung dịch phản ứng cho mỗi ống.
2.2 Cho 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang.
3. khuếch đại qRT-PCR
3.1 Kênh tín hiệu huỳnh quang: Chế độ phát hiện đầu dò được đặt là: Reporter Dye1: FAM, và Quencher Dye:NONE.
3.2 Các điều kiện phản ứng phải được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
quá trình UNG | 37℃ trong 2 phút | 1 | |
tiền biến tính | 95℃ trong 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây Đặt để thu thập tín hiệu huỳnh quang tại kết thúc giai đoạn này | |||
【Giải thích kết quả】
1. Bản án hợp lệ:
1.1 Kiểm soát Tích cực: Giá trị Ct của kênh FAM ≤ 32 và đường cong khuếch đại có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể.
1.2 Kiểm Soát Tiêu Cực: Kênh FAM không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại là đường thẳng hoặc hơi xiên.
2. Kết quả kiểm tra đánh giá:
Nếu kênh phát hiện FAM của mẫu thử nghiệm có không có đường cong khuếch đại, nó có thể được xác định là MB âm.
Nếu kênh phát hiện FAM có đường cong khuếch đại tăng theo cấp số nhân và giá trị Ct là ≤ 36, nó có thể được xác định là MB tích cực.
36 mẫu nên được coi là kết quả đáng ngờ, và phân tích nên được lặp lại để xác nhận.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet phải được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Bovis
【Tên sản phẩm】Real-time PCR Detection Kit cho Mycoplasma Bovis
【Bưu kiện】50 bài kiểm tra
【chỉ định】Real-time PCR Detection Kit for Mycoplasma Bovis được áp dụng để phát hiện RNA của Mycoplasma Bovis trong tăm bông mũi, sữa, mẫu dịch khớp.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ cho mục đích nghiên cứu và không dùng cho chẩn đoán lâm sàng.
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
Giải pháp phản ứng MB | 1150µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tích cực MB | 100µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 100µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ chiết xuất RNA đã được thương mại hóa có thể được thực hiện để chiết xuất axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. Khuếch đại PCR (Ví dụ về ABI 7500, tham khảo thao tác này và hướng dẫn sử dụng cho ABI 7300 và LC480.)
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho 20µl to của dung dịch phản ứng cho mỗi ống.
2.2 Cho 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu lần lượt vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây rồi đưa vào bộ khuếch đại PCR định lượng huỳnh quang.
3. khuếch đại qRT-PCR
3.1 Kênh tín hiệu huỳnh quang: Chế độ phát hiện đầu dò được đặt là: Reporter Dye1: FAM, và Quencher Dye:NONE.
3.2 Các điều kiện phản ứng phải được thiết lập như sau:
Các thông số của khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích là 25µl | ||
Điều kiện phản ứng PCR | Giai đoạn | Điều kiện | chu kỳ |
quá trình UNG | 37℃ trong 2 phút | 1 | |
tiền biến tính | 95℃ trong 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃ trong 10 giây |
40 | |
60℃ trong 30 giây Đặt để thu thập tín hiệu huỳnh quang tại kết thúc giai đoạn này | |||
【Giải thích kết quả】
1. Bản án hợp lệ:
1.1 Kiểm soát Tích cực: Giá trị Ct của kênh FAM ≤ 32 và đường cong khuếch đại có giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân đáng kể.
1.2 Kiểm Soát Tiêu Cực: Kênh FAM không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại là đường thẳng hoặc hơi xiên.
2. Kết quả kiểm tra đánh giá:
Nếu kênh phát hiện FAM của mẫu thử nghiệm có không có đường cong khuếch đại, nó có thể được xác định là MB âm.
Nếu kênh phát hiện FAM có đường cong khuếch đại tăng theo cấp số nhân và giá trị Ct là ≤ 36, nó có thể được xác định là MB tích cực.
36 mẫu nên được coi là kết quả đáng ngờ, và phân tích nên được lặp lại để xác nhận.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet phải được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
