Tình trạng sẵn có: | |
---|---|
Bộ Real-Time PCR phát hiện vi-rút Dịch tả lợn châu Phi (VP72/I177L)
【Tên sản phẩm】Bộ kit Real-time PCR Phát hiện Virus Dịch tả lợn Châu Phi (VP72/I177L)
【Bưu kiện】50 bộ/hộp
【Chỉ định】Bộ công cụ phát hiện vi-rút sốt lợn châu Phi được áp dụng để phát hiện DNA phân nhóm VP72/I177L của vi-rút sốt lợn châu Phi trong các mẫu nước bọt, máu, mô và môi trường của lợn.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ mục đích nghiên cứu, không dùng cho chẩn đoán lâm sàng
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
1000µl/Ống | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) Kiểm soát Tích cực | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Ứng dụng】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus và các công cụ PCR thời gian thực khác.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu tương ứng vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây và đặt chúng vào Real-Time PCR...
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 25µl | ||
thu thập tín hiệu | Tín hiệu huỳnh quang ASFV (VP72/I177L) | I177L-HEXchannel thu thập tín hiệu huỳnh quang | |
Kênh VP72-FAM thu tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR | Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
xử lý UNG | 37℃: 2 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃: 10 giây |
40 | |
60℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
【Giải thích kết quả】
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM và HEX ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát tiêu cực: Các kênh FAM và HEX không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán đoán | kênh FAM | kênh lục giác |
- | + | |
VP72 ASFV axit nucleic dương tính | + | - |
VP72 và I177L ASFV axit nucleic dương tính | + | + |
VP72 và I177L ASFV axit nucleic âm tính | - | - |
*Ghi chú:
(1) Nếu có đường cong khuếch đại tăng theo cấp số nhân và giá trị Ct ≤ 36, thì nó có thể được xác định là '+'.Nếu không có đường cong khuếch đại, nó có thể được xác định là '-'.Khi 36 < giá trị Ct < 40, các mẫu nên được coi là kết quả nghi ngờ và phải lặp lại phân tích để xác định cấu tạo.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810
Bộ Real-Time PCR phát hiện vi-rút Dịch tả lợn châu Phi (VP72/I177L)
【Tên sản phẩm】Bộ kit Real-time PCR Phát hiện Virus Dịch tả lợn Châu Phi (VP72/I177L)
【Bưu kiện】50 bộ/hộp
【Chỉ định】Bộ công cụ phát hiện vi-rút sốt lợn châu Phi được áp dụng để phát hiện DNA phân nhóm VP72/I177L của vi-rút sốt lợn châu Phi trong các mẫu nước bọt, máu, mô và môi trường của lợn.Kết quả xét nghiệm chỉ phục vụ mục đích nghiên cứu, không dùng cho chẩn đoán lâm sàng
【Các thành phần và nội dung chính】
Tên | Sự chỉ rõ | Số lượng |
1000µl/Ống | 1 | |
ASFV (VP72/I177L) Kiểm soát Tích cực | 250µl/Ống | 1 |
Kiểm soát tiêu cực | 250µl/Ống | 1 |
【Lưu trữ và thời hạn sử dụng】
Bảo quản ở -20±5℃, Cấp đông và rã đông lặp lại ≤ 3 lần, thời hạn sử dụng là 12 tháng.
【Ứng dụng】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus và các công cụ PCR thời gian thực khác.
【Phương pháp kiểm tra】
1. Chiết xuất axit nucleic
Bộ dụng cụ tách chiết DNA thương mại hóa có thể được thực hiện để tách chiết axit nucleic, vui lòng làm theo hướng dẫn của bộ dụng cụ.
2. khuếch đại PCR
2.1 Tính số lượng mẫu thử, lấy n+2 ống phản ứng PCR, cho vào mỗi ống 20µl dung dịch phản ứng.
2.2 Thêm 5µl axit nucleic đối chứng âm tính, đối chứng dương tính và các mẫu tương ứng vào các ống phản ứng PRC ở trên, ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây và đặt chúng vào Real-Time PCR...
2.3 Các điều kiện phản ứng được thiết lập như sau:
Các thông số liên quan của bộ khuếch đại | |||
Hệ thống | Tổng thể tích: 25µl | ||
thu thập tín hiệu | Tín hiệu huỳnh quang ASFV (VP72/I177L) | I177L-HEXchannel thu thập tín hiệu huỳnh quang | |
Kênh VP72-FAM thu tín hiệu huỳnh quang | |||
Điều kiện phản ứng PCR | Sân khấu | Condition | số chu kỳ |
xử lý UNG | 37℃: 2 phút | 1 | |
tiền thoái hóa | 95℃: 30 giây | 1 | |
PCR | 95℃: 10 giây |
40 | |
60℃: 30 giây (Thiết lập để thu thập tín hiệu huỳnh quang ở cuối giai đoạn này) |
【Giải thích kết quả】
1. Xác định hiệu quả của bộ xét nghiệm:
(1) Kiểm soát tích cực: Giá trị Ct của các kênh FAM và HEX ≤ 32, đường cong khuếch đại với pha hàm mũ rõ ràng.
(2) Kiểm soát tiêu cực: Các kênh FAM và HEX không có đường cong khuếch đại hoặc đường cong khuếch đại thẳng hoặc hơi xiên.
2. Xác định kết quả:
kết quả phán đoán | kênh FAM | kênh lục giác |
- | + | |
VP72 ASFV axit nucleic dương tính | + | - |
VP72 và I177L ASFV axit nucleic dương tính | + | + |
VP72 và I177L ASFV axit nucleic âm tính | - | - |
*Ghi chú:
(1) Nếu có đường cong khuếch đại tăng theo cấp số nhân và giá trị Ct ≤ 36, thì nó có thể được xác định là '+'.Nếu không có đường cong khuếch đại, nó có thể được xác định là '-'.Khi 36 < giá trị Ct < 40, các mẫu nên được coi là kết quả nghi ngờ và phải lặp lại phân tích để xác định cấu tạo.
【Các biện pháp phòng ngừa】
1. Việc quản lý phòng xét nghiệm phải thực hiện theo đúng quy định về quản lý phòng xét nghiệm khuếch đại gen PCR.Nhân viên phòng thí nghiệm phải được đào tạo chuyên nghiệp.Quá trình thí nghiệm được tiến hành nghiêm ngặt tại các khu vực khác nhau (Khu vực pha chế thuốc thử, khu vực pha chế bệnh phẩm, khu vực khuếch đại và phân tích sản phẩm).Tất cả các vật tư tiêu hao phải dùng một lần sau khi khử trùng.Không được sử dụng chéo các thiết bị, thiết bị và vật tư đặc biệt ở từng giai đoạn của quá trình thí nghiệm.
2. Vui lòng chuẩn bị tủ an toàn sinh học cho giai đoạn chuẩn bị thuốc thử và mẫu bệnh phẩm.Áo khoác phòng thí nghiệm, găng tay dùng một lần và pipet sẽ được thực hiện trong quá trình thí nghiệm.
3. Phải tránh đóng băng và rã đông thuốc thử nhiều lần càng nhiều càng tốt.Trước khi sử dụng, thuốc thử phải được rã đông hoàn toàn và ly tâm ở tốc độ 8000 vòng/phút trong vài giây.
4. Vui lòng đặt pipet được sử dụng trong khu vực chuẩn bị mẫu vào hộp chứa chất khử trùng và vứt bỏ chất thải sau khi khử trùng.
5. Sau thí nghiệm, bàn làm việc và pipet được xử lý bằng 10% hypochlorite hoặc 75% cồn hoặc đèn cực tím.
【sản xuất】
Tên: Shandong Xinda Gene Technology Co., Ltd
Công ty con của Shandong Sinder Technology Co., Ltd
Địa chỉ: Tòa nhà B2, Khu công nghiệp Bandaohuigu, Đường Shungeng, Thành phố Chư Thành, Tỉnh Sơn Đông
Mã Bưu Chính: 262233
Điện thoại: +86 - 0532 5882 0810